联合国艾滋病规划署/世界卫生组织全球艾滋病/性病监测工作组

Guidelines for Using HIV Testing Technologies

in Surveillance

UNAIDS/WHO Working Group on Global HIV/AIDS/STI Surveillance

全球HIV和性病监测工作是世界卫生组织(WHO)和联合国艾滋病规划署(UNAIDS)相互同建的领域。UNAIDS /WHO全球艾滋病和性病监测工作组成立于1996年，该小组是二者在监测领域中主要的合作和实施机制，从而通过收集现有的最佳信息和改善资料的质量，为知情决策以及在国家、地区和全球水平上制定规划而提供服务。

UNAIDS和WHO感谢所有那些在本指南的开发过程中倾注时间和精力、提供宝贵经验和建议的人。

美国亚特兰大的疾病预防控制中心(CDC)为本指南的准备做出了特殊贡献。特别感谢主要人员 Dr. Christopher Murrill 和 Dr. Rebecca Martin在撰写本书中所做出的努力。Sadhna Patel女士和Beatrice Divine女士协助完成了本指南的编辑工作。

特别感谢WHO的Dr. Gaby Vercauteren和Dr. Susan Best及CDC的Dr. Mark Rayfield和Tim Granade先生所提供的技术支持，以及对初稿关键性的审阅。

位于华盛顿的美国国际发展署（USAID）全球局的人口、健康和营养中心对指南的开发提供了支持，从而使这项工作能够顺利进行。

World Health Organization and Joint United Nations Programme on HIV/AIDS, 2001

WHO/CDS/CSR/EDC/2001.16          UNAIDS/01.22E          ISBN 9173-92-063-7

本指南不是WHO和UNAIDS的正式出版物，但享有保留版权。但如果不是用于商业目的，可以任意对本文部分或全部内容进行综述、摘录、复制和翻译。本出版物中作者所表达的观点由其本人负责。

 正文中所提到的某些公司或某些制造商的产品并不意味着这些公司的产品较其他尚未提及的公司的产品优先得到WHO或UNAIDS认可或推荐。除非错误和遗漏, 所有专利产品名称的字头均大写, 以示区别。

目录

2.0 HIV血清学监测中HIV检测概述       

    2.1 HIV检测的目的     

    2.2 HIV检测方法       

    2.3 调查的人群     

    2.4 HIV感染发生率的测量       

3.0 HIV检测使用的标本     

    3.1 标本的选择    

        3.1.1   全血、血清和血浆的优缺点      

        3.1.2   尿液和唾液的优缺点    

    3.2 血液标本的收集、处理和贮存    

        3.2.1   全血、血清和血浆     

            3.2.1.1 对静脉抽血方法收集的血液进行处理      

             3.2.1.2 对静脉抽血方法收集的血清和血浆进行贮存        

            3.2.1.3 收集指尖血     

             3.2.1.4 HIV检测用干血滤纸片的制备和贮存     

    3.3 尿液和唾液的收集和贮存

        3.3.1   尿液和唾液的收集     

            3.3.1.1 尿液      

            3.3.1.2 唾液      

        3.3.2   尿液和唾液的贮存     

    3.4     标本的编码和记录      

        3.4.1   标本的编码    

        3.4.2   标本的记录   

4.0 目前在监测中使用的HIV检测技术和策略     

    4.1 HIV检测技术           

        4.1.1   HIV检测概述   

        4.1.2   酶免疫测定（EIA)      

            4.1.2.1 一般描述      

             4.1.2.2 EIA的特性     

             4.1.2.3 EIA的操作     

        4.1.3   快速试验       

            4.1.3.1 一般描述       

            4.1.3.2 快速试验的特点    

            4.1.3.3 快速试验的操作    

    4.2 用于监测的HIV检测策略  

5.0 对用于HIV监测的HIV检测技术的选择与评价      

    5.1 如何选择检测方法      

    5.2 对选择的检测方法的国家评估    

6.0 实验室质量保证与安全    

    6.1 国家质量保证          

    6.2 实验室质量保证   

        6.2.1   分析前阶段     

        6.2.2   分析阶段       

        6.2.3   分析后阶段     

    6.3 安全规程       

附件:医疗卫生场所预防HIV、乙肝病毒及其它经血传播病原体传播的普遍防护原则    

词汇:      

参考文献:      

由于HIV流行给全球带来了越来越严重的负担， 因此, HIV的监测将显得尤为重要。通过这样的监测工作, 从而能够对流行的趋势加以了解, 并对有效的预防作出正确的决策。在发展中国家更是如此，大多数HIV新感染和持续感染者是分布在这些国家。为了帮助各国根据本国的流行状况（低流行、集中流行和广泛流行）, 针对性地开展监测活动，世界卫生组织(WHO)和联合国艾滋病规划署(UNAIDS)已经建立了一个改善HIV监测的理论性框架－第二代HIV监测。第二代HIV监测指南提出了一些措施，旨在更好地利用监测的资料来提高和改进对HIV流行的对策。由于生物学监测(血清学监测)是大多数HIV监测活动的重要组成部分，因此，对现有的HIV检测技术的了解是非常重要的。

 针对于第二代HIV监测，这些实验室指南提出了如何根据国家实验室的条件和监测需求来选择、评价和应用HIV检测技术与策略。该指南对标本的选择、收集、贮存和检测，以及对适当的HIV检测策略和技术的选择与评价提出了推荐性的建议，以满足监测的目的。同时在指南中也强调了质量保证的问题。

本技术指南是为发展中国家HIV监测的协调人员, 以及其他为监测目的而参与HIV检测的卫生专业人员所编写。它们是针对第二代HIV监测系统所开发的系列性操作指南中的一部分。

UNAIDS和WHO建议采用第二代HIV监测策略以改善对艾滋病预防与控制所需资料的收集、分析和使用。促进第二代HIV监测的利用也有助于各国和国际机构对HIV流行状况的监控, 并指导他们的防治实践（UNAIDS/WHO 2000）。使用第二代HIV监测方法，其监测系统应当是灵活的，可以随着国家的需求及流行状况: 低流行、集中流行和广泛流行（框图1）的不同而有所改变（UNAIDS/WHO 2000）。如果一个国家是按照第二代HIV监测的原则来建立和加强他们的监测规划，那么他们所收集的监测资料将可以更好地用于上述目的。

第二代HIV监测依赖于生物学监测（血清学监测）、行为监测和其它来源（如HIV/AIDS病例报告、死亡登记、性传播感染监测、结核病监测）所获得的资料来描述一个国家的HIV流行状况, 并作出有效的反应。其目的是改善这些不同来源资料的综合利用, 同时也有助于对新的流行病学方法进行不断的探讨，对流行状况估计与预测的方法加以不断的改进, 以及更好地利用资料进行政策倡导、规划、督导和评估。

HIV血清监测资料可以用来估计HIV患病率和地区分布，监测特殊人群HIV流行的时间变化趋势，以及确定处于感染高危状况的人群。这些信息将用来帮助国家制定HIV策略和确定优先领域、计划和评价预防项目，以及评估国家对流行状况加以控制的效果。

由于生物学监测是地方或国家确定HIV患病率的基本方法，因此准确的HIV检测对第二代HIV监测是非常重要的。随着免疫诊断学的发展，HIV检测技术已经有了巨大的发展。目前提供的酶免疫测定（EIA）方法比前几代EIA更为准确，并且最新一代的HIV快速试验可以在具备很少经验和不需要使用仪器设备的情况下45分钟内提供与EIA相似的结果。这些快速试验使那些在过去无法开展检测的地区(如实验室资源有限的地区)现在可以开展HIV监测所需的检测，以及那些接受不到临床服务、难以接触到的目标人群(如暗娼)现在可以得到检测。

本指南为标本收集的种类、贮存和检测方法提供了指导。同时介绍了由WHO基于HIV患病率和现有用于生物学监测的HIV检测技术所推荐的HIV检测策略。该指南还包括了与诊断性检测的策略和技术相关的信息，因为诊断性检测所获得的资料也可以作为监测信息的来源。指南中描述了如何选择和评价适合不同国家流行状况和不同需求的检测方法。由于准确的检测结果对于HIV的生物学监测是至关重要的，因此也重点讨论了质量保证措施的问题。指南的最后列出了正文中所用的词汇。这些技术指南是为发展中国家的 HIV 监测协调人员和其他为监测目的而参与HIV检测的卫生专业人员所编写。它们是第二代HIV监测指南中的一部分。

为了对本指南有一个全面的了解，对开展HIV检测的目的、血清学监测中采用的各种检测方法及检测的人群有所了解是非常重要的。

HIV检测可以用于监测、诊断或血液筛查（UNAIDS/WHO 1998）。在发展中国家，绝大多数以监测为目的HIV检测是作为不同人群血清感染率调查的一部分，这些人群包括诸如产前门诊孕妇、性病患者、暗娼或静脉吸毒者。此外，用于诊断目的（如自愿咨询和检测门诊）和血液筛查目的（如献血者）的检测结果，以及在其他人群（如征兵者）中常规检测的结果可以为监测目的提供额外的感染率资料。这些来自诊断性检测、血液筛查和其他人群常规HIV检测的资料不可以外推到一般人群，因为这些资料存在内在的偏倚。  

为血清学监测而选择的HIV检测方法取决于多种相关因素，如国家政策、流行状况、HIV检测的适宜人群和场所。无关联匿名的HIV检测（非知情同意）通常只有在门诊常规收集血液用于其他目的（通常为梅毒检测）的情况下才采用（框图2）。如果可能的话，这样的检测应该在有条件提供自愿咨询检测与转诊的诊所中开展。如果标本的收集单纯是为了HIV检测，最好在知情同意的情况下进行关联检测（保密或匿名），例如，在门诊无法接触到的人群（难以接近的人群，如静脉吸毒者、暗娼、男性同性恋者）中开展HIV监测（框图2）。如果标本的收集仅是为了HIV检测，也可以采用知情同意原则下的无关联匿名检测，这取决于国家的相关政策和指南。

当需要知情同意时（框图2），必须按照各国的相关政策和指南在HIV标本检测前进行。在采用知情同意的情况下，参与性偏倚是一个重要的问题，分析时应该进行评价并加以考虑。

对每份HIV检测的标本都要进行编码。编码的目的是为了在检测过程中区分不同的标本。对每份标本来说，编码是唯一的，它可以与个人的身份信息（如姓名、临床识别号）关联或无关联，这完全取决于所进行的HIV检测是关联的还是无关联的。编码可以与人口学特征（如年龄、性别、婚姻状况、居住地）（在关联和无关联检测中）及高危行为方面的信息（在关联检测中）相关联。这些信息是在标本收集的同时一起收集。

a   UNAIDS/WHO全球HIV/AIDS/STI监测工作组对该方法的使用进行了描述，其在HIV监测工作中的应用应该遵循本国的国家政策。

b   知情同意是基于这样的原则，即有能力的人有权利针对医疗服务提供者与患者之间的这种专业上的关系对某些事件的参与和认可作出自己的决定。知情同意确保了个人在选择上的自由，以及尊重了他/她们的自主权，特别是有关对他/她们的身体与健康有影响的决定。（摘自WHO/全球艾滋病规划1992）

非知情同意的无关联匿名检测（图2.1）只有在临床上为其它目的(如产前门诊梅毒检测)而收集血液时才采用。在进行HIV检测之前必须将标本上所有关于血液来源的信息去掉。这样，检测结果就无法追回到患者，进而也就无法向患者反馈检测结果。

*工作人员1和2不应该是同一个人，这样可以使患者的匿名得到保证。

为了在门诊和实验室确保病人的匿名， 必须由一名工作人员收集标本，由另一名工作人员进行检测。一名工作人员（临床医生或实验室技术人员）应当负责收集和处理用于临床常规检测和HIV无关联匿名检测的标本。对无关联匿名HIV检测标本的处理需要移出一份血置于另一个试管中, 并编上与任何个人信息无关联的新编码，由另外一名工作人员进行无关联匿名HIV检测。

在某些情况下，一名工作人员（实验室技术人员）既负责收集标本又负责无关联匿名检测。在这种情况下，建议由另外一名工作人员进行无关联匿名检测标本的处理(即移出一份血置于编有新编码的新试管中，该新编码与任何个人信息无关联)。

在收集标本的时候，一名工作人员收集病人的人口学信息（如年龄、性别、婚姻状况、居住地）及病史。这些信息记录在临床表格中，并在标本上编码（如姓名、临床识别号）。针对无关联匿名HIV检测对标本进行处理后，将该标本重新编上新编码，同一名工作人员将新的编码登记在监测表格上，并摘录必要的人口学信息（如年龄、性别、婚姻状况）。这样，所摘录的信息就不会与任何个人信息相关联。无关联匿名HIV检测结果将通过新编码与人口学信息相对应，供分析。重要的是如果收集的人口学信息太多，则会识别出个体，从而不能保证标本的匿名性。

在血液标本不能作为其他目的而收集的情况下，采用非知情同意的无关联匿名检测被认为是不符合伦理学原则的。因此，在这种情况下，应当提供关联检测，并给予免费的自愿咨询和检测服务。如果国家政策允许，应采用知情同意的无关联匿名检测。

在采用知情同意的无关联匿名检测时，要询问参加者是否同意参与HIV监测项目，并且告诉参加者由于标本上不存在任何个人的信息，所以HIV检测的结果将是无关联的, 因此，将无法追回到哪个参加者具有阳性检测结果。应当向参加者提供免费的检测和咨询服务。任何人都可以拒绝参加该项目，因此可能会产生参与性偏倚。

关联检测（图2.2）涉及到HIV检测结果与被检测者之间的关联，被检测者可以得到自己的HIV检测结果。这种方法需要获得知情同意并提供检测前后的咨询。临床上可以是或可以不是关联检测。关联检测可以是保密或者是匿名的。由于被检测者可以得到HIV检测结果，关联检测需要附加HIV的确证试验。

在进行关联保密检测时，被检测者同意进行HIV检测，但需要保证检测的结果是保密的，并且只有规定的卫生服务人员可以知道结果。 HIV检测结果可以通过与个人信息相关联的编码与被检测者对应起来。在关联保密检测时，一名工作人员负责在标本收集前获取知情同意和提供检测前咨询，然后对标本进行编码，该编码可以与个人身份信息（如姓名和临床识别号）相关联。在关联保密HIV检测后，将检测结果告知被检测者，同时提供检测后咨询。

在关联匿名检测时，被检测者同意接受HIV检测。标本收集和处理的方法与关联保密检测相同，但标本的编码不与被检测者个人身份信息相关联，只有被检测者本人才能将检测结果与自己对应起来。

HIV的流行状况决定了要在哪些人群中进行调查。在HIV广泛流行的国家，主要是在产前门诊孕妇中开展哨点血清学监测，以此作为监测系统的基础。血清监测主要在大的诊所、医院的门诊部或卫生中心开展。在HIV集中流行或低流行的国家，主要是在一些被认为处于感染高危状况下的特殊人群（如暗娼及其嫖客、静脉吸毒者或男性同性恋者）中进行。因此，这类人群活动的场所被选为哨点。这些哨点可能包括性病诊所、戒毒中心、教养所、妓院、酒吧及俱乐部。调查的其他人群可以包括（1）入伍征兵者或军人，以及(2)感染危险性较高的职业人群，如工厂工人、煤矿工人和流动人口。在这些人群中所获得的感染率只适用于被调查人群本身，不适用于一般人群。

有关在开展HIV监测活动中如何选择和抽取合适人群与哨点的深入讨论超出了本指南涉及的范围。

一种对HIV试验加以改良的称为“增敏检测方法”（detuned assay）或“近期HIV阳转标准检测流程（STARHS）”目前只是用来作为测量HIV感染发生率（新HIV感染率）的研究手段。在任何国家，这类方法均未获准作为非研究目的加以应用。然而，由于这些方法在现场监测中的应用目前正处于开发阶段，所以在这里加以简述。

应用STARHS可以确定一个HIV感染者是否在近期被感染。特别是它能够指明一个人是否在检测前的平均大约130天内发生血清阳转（产生HIV抗体）（Janssen等，1998）。这种能够区别新旧感染的能力使得可以通过一次横断面调查来估计目前的HIV发生率。这种HIV发生率的估计对于评估目前HIV感染的趋势是十分有价值的。

借助于HIV检测技术，多种类型的标本可以用于HIV生物学监测：全血、血浆、血清、唾液及尿液。选择什么样的标本取决于后勤状况、确定的监测人群和哨点，以及HIV检测策略。标本必须采用适当的方式收集、检测和贮存，以便能够获得准确和可信的结果。

对于血清学监测来讲，在地区或国家实验室进行HIV检测前通常需要对标本进行收集和贮存。血清、血浆和干血滤纸片可以贮存起来，以后再进行检测。贮存的要求取决于标本的种类。

在当地不能进行检测的标本需要运送到地区或国家实验室进行检测。运送标本的方法取决于各国的基础设施情况。少数国家具备连接卫生服务机构与实验室之间的运送系统。大多数情况下，是由现场监测人员自己将标本从当地运送到国家实验室。

3.1.1 全血、血清和血浆的优缺点

全血、血清和血浆可以通过静脉抽血或指尖扎针的方式收集（见3.2），这些瓯驹贖IV检测中的优缺点如下：

优点

• HIV抗体的浓度比尿液和唾液高（Rose等，1997）。

• 可以使用同份标本，加到常规检测(如梅毒、乙肝、丙肝)中。

• 可以用来进行专题研究（如HIV分型［HIV1和2］、HIV亚分型、抗逆转录病毒耐药研究）。

• 在具备实验室，并且有经过培训的采血人员的情况下，则可以容易地在临床开展标本的收集和检测。

• 在非临床场所也容易开展标本的收集（指尖全血）。

缺点

• 需要侵入性采血技术。

• 需要有经验的实验室人员（进行血清和血浆的收集与处理）。

• 与尿液和唾液相比，需要更多的设备（如针头、试管或三棱针等），以及生物有害物的处理装置。

• 如果需要静脉抽血的话，在非临床场所难以开展血清和血浆的收集。

• 与唾液相比，对卫生工作者和实验室人员来说，明显增加了职业暴露的危险，因为不仅血液中抗体浓度较高，而且标本收集时需要使用尖锐器具。

3.1.2 尿液和唾液的优缺点

除了血液及血液成分外，其它一些标本也可以用于HIV检测。在知情同意的关联检测中，可以采用唾液。除血液之外，在部分临床诊所，尿液是无关联匿名检测中常规收集的唯一其它标本。

优点

• 在标本收集和处理方面，不需要经过培训的技术员。

• 不必要接触可能有污染的实验室器材，如用过的针头或三棱针。这些污染物需要有生物有害物的处理装置。

• 唾液可以在各种现场条件，包括非临床场所进行收集。

• 对于难于接近的人群，收集唾液要比静脉抽血或指尖采血更容易被接受。因此，可能会有更多的目标人群愿意接受检测。

缺点

• 尿液EIA检测的敏感度和特异度低于用血液进行的检测（Martinez 等，1999）。

• 尿液标本必须在实验室中进行检测（EIA）；目前尚无快速试验方法可以提供。

• 唾液标本收集可能需要特殊的设备。

• 目前可以用于这类标本检测的手段是有限的。

• 与血清或血浆相比，费用可能更高。

• 可能需要额外备一份标本（血样）用于确证。

• 不能为专题研究进行额外的检测（如HIV1与2、HIV亚分型、抗逆转录病毒耐药检测）。

3.2.1 全血、血清和血浆

用于HIV检测的血液可以通过静脉抽血（全血、血清、血浆）或通过指尖采血（全血）进行收集。

3.2.1.1 对静脉抽血方法收集的血液进行处理

按照当地临床或实验室操作规程，以静脉抽血的方法收集血液。参见附件及6.3部分中有关安全规程的内容。

对于以静脉抽血方法收集的血液，建议按照下列步骤进行处理（国家临床实验室标准委员会［NCCLS］1998）：

1. 收集病人静脉血10ml，置于10ml的无菌试管中。

    用于血清分离时，将血液置于红色盖子的试管中（不加抗凝剂）。

    用于血浆分离时，将血液置于粉色盖子的试管中（加入抗凝剂，如EDTA）。

出于安全考虑，建议采用真空血液收集系统（如Vacutainer管）。（注：在常规血液收集过程中，额外采集一份血，纯粹用于无关联匿名检测被认为是不符合伦理学原则的，且建议不使用。）如果对收集的血液标本不考虑或无法立刻进行处理（如没有离心机），则将血液置于含有EDTA的粉色盖子的试管中。将血液静置20－30分钟，然后用移液管小心吸出血浆，不要吸出过多的红细胞。在24小时内对标本进行处理（见步骤3）和检测以防标本的溶血。这时也可用抗凝血制备成干血滤纸片。

2. 对标本进行离心以分离血清（在不含EDTA的试管中）或血浆（在含EDTA的试管中）。如果收集血液用于血清分离，则将血液静置20－30分钟，这样在离心之前就会形成血凝块。一般情况下，标本应当在300－400g或1200－1500转/分下离心10分钟（Lennette等，1985）。

3. 在标本离心后或放置足够时间使其分离后，用干净的移液管（不要采用倾倒的方法）吸取上清液0.5-2.0ml，移入另一个无菌的标有编码的试管中（塑料管，不是玻璃管）或离心管中（1.5-2.0ml，带螺盖），拧紧瓶盖。标本即可用于贮存和检测。

3.2.1.2对静脉抽血方法收集的血清和血浆进行贮存

贮存血清和血浆时，要考虑以下方面（NCCLS 1990）:

• 确保标有编码的离心管或塑料管盖子拧紧。（不要用玻璃管贮存标本）。将离心管置于分格插入式的冰冻盒内。

• 如果要将标本运送到开展检测的实验室，应立即将冷冻盒立式放入含有冰袋的冷藏箱内，以便在冷藏箱内能够保持4℃环境。如果没有冰袋，血清标本可以在室温下贮存3天。室温下放置更长的时间可能会导致细菌过度生长和标本的破坏。

• 如果在运往检测实验室前标本在收集地的贮存时间超过3天，应将标本冻存在－20℃的无霜冰箱中。对于长期保存，最好是将标本贮存在－70℃的无霜冰箱中。

• 控制冻溶次数，不要超过5次，因为多次解冻会影响抗体水平进而影响检测结果。

3.2.1.3 收集指尖血

通过指尖扎针收集的血液可以用来进行快速试验或在滤纸上制成干血滤纸片。在农村或非临床场所也许干血滤纸片更为首选。这些地方通常没有经过培训的抽血人员和缺乏具备适当设备（如离心机）的实验室。

1. 指尖采血时，先按摩手指（最好是中指和无名指），这样可以使血液集中在指尖。

2. 用70％的异丙醇清洁（擦洗）指垫（不要只清洁指尖或手指侧面）。用消毒棉签擦去酒精。

3. 用消毒的三棱针用力扎指垫。用消毒棉签擦去第一滴血，然后收集随后的血液置入快速试验的设备中或滴到滤纸上制成干血滤纸片。如果第一次扎针力量不够，不要再在同一处采血，需要换另一处或其他手指采血。不要吮吸或挤压针刺部位，因为这样会导致标本溶血，从而导致检测结果的不可信（NCCLS 1999）。也可以用耳垂替代手指采血。

3.2.1.4 HIV检测用干血滤纸片的制备和贮存

指尖或耳垂针刺收集的血液可以用来制备干血滤纸片（George等，1989）。尽管指尖采血是最为典型的采血方法，但也可以利用含抗凝剂的试管所收集的血液来制备干血滤纸片（NCCLS 1997）。干血滤纸片具有易于运输，且不需要冷链的优点。

1. 将直接采自指尖或用移液管吸取的血液置于特殊的滤纸上（Schleicher和Schuell Grade 903滤纸或Whatman BFC 180滤纸）。滤纸上可能有一个事先印好的圆圈，血液填满整个圆圈则表明含有100祃血液。如果滤纸上没有印好的圆圈，那么，需要在滤纸上制备一个直径为1.5cm的血斑。让血液浸透并填满整个圆圈。注意：如果血液没有浸入滤纸，该滤纸则不能使用。

2. 血液浸透滤纸之后（整个圆圈浸满），在滤纸的一侧标上编码。

3. 将圈内浸满血液的滤纸条悬挂起来，以便在干燥过程中滤纸四周可以通风。用于放置滤纸条的底座可以商品化提供。但是，也可以通过将两本书放在桌面或实验台上，然后将滤纸条放在两本书之间进行干燥（将滤纸条的边缘用胶带粘在书上），这样可以使得滤纸上的血液部分不与桌面或实验室台面接触。确保胶带不要贴到血斑上。

4. 让血液滤纸片于室温下自然干燥至少4小时（在潮湿气候下至少24小时）。不要加热血片或将他们堆叠在一起，干燥过程中不要与其它界面接触。

5. 在血片充分干燥后，将滤纸条包在玻璃纸或塑料纸里，避免滤纸之间标本的污染。

6. 将包裹好的滤纸条置于一个密封的袋子中，在袋子内放上干燥剂及湿度指示卡。每个袋子可放入大约20条滤纸条。该密封的袋子可以在室温下放置长达30天，在4℃下贮存长达90天。如果密封袋中的干血滤纸片需要贮存90天以上，则应贮存在－20℃条件下（George等，1989）。也已表明，正确贮存的干血滤纸片可以在至少2年内保持稳定。密封袋应当放在坚固的包装中进行运输（Knudsen等，1993）。

3.3.1 尿液和唾液的收集

对于标本的收集，应遵循检测说明以及当地实验室操作规程。参见6.3部分中有关安全规程内容。

3.3.1.1 尿液

目前有多种用于尿液标本检测的EIA方案，但是，尚无供尿液标本检测的快速试验。

在收集尿液过程中，需要考虑的是：

• 在使用以尿液为标本的EIA检测试剂盒时，通常至少需要200祃的尿液。

•  可以在一天当中的任何时候收集尿液，不需要收集中段尿。

• 可以加入一些防腐剂便于贮存，尽管并不一定需要。

3.3.1.2 唾液

唾液可以用于改良EIA检测和快速试验检测。唾液的快速试验目前尚处在现场评价阶段。

标本收集的一般步骤如下：

1. 将一个经过特殊处理的吸附垫置于塑料棒上(通常由试剂盒生产厂家提供)。

2. 将吸附垫置于被检测者的口腔内颊深处，放置的时间见生产厂家的说明书。然后将吸附垫放入含有防腐液的小瓶中(通常由试剂盒生产厂家提供)。

由于检测的复杂性，供EIA检测的唾液标本需要送到国家实验室进行检测。

3.3.2尿液和唾液的贮存

尿液标本应当装在含有防腐剂的塑料离心管中。加有防腐剂的尿液标本可以在4－8℃下存放长达1年。供HIV检测的尿液标本不一定要冷冻贮存。

唾液标本在4－37℃环境下最多可以贮存21天（包括运输和检测的时间）。唾液标本应当冷藏运输。标本可以冷冻（－20℃）贮存有限的时间（大约6周）。一旦解冻，该标本可以再一次冻存。在检测前，先阅读检测试剂盒中附带的说明书，以了解更多具体的有关贮存的信息。

3.4.1 标本的编码

在标本收集和处理的过程中，对含有标本的塑料管、离心管或滤纸片必须编上编码。如果使用标签，要确保标签贴在试管的侧面，而不是贴在盖子上。在标本贮存于离心管时，应该使用预先印好的、专门用于冷冻贮存的耐低温标签。监测协调员应当向负责标本收集的现场人员提供一整套的标签或不掉色的记号笔，以及供使用的编码。

对于无关联匿名检测来说，仅在试管上标上与个人身份无关联的新编码（见图2.1）。

3.4.2 标本的记录

应当准备一个专门的实验室记录本或表格，根据相应的编码记录HIV检测结果。记录本只掌握在实验室和监测人员手里，不使用时，应当安全地锁在抽屉或文件柜中以保证这些被检测者其检测结果的保密性，以及确保他们对监测活动的参与（见图2.1，2.2）。

对于无关联匿名检测来讲，在记录本或表格中仅记录新编码及其相应的HIV检测结果。 那些能够识别出受检者个人身份的信息不应记录在内。HIV检测结果可以通过新编码，以及与早期从监测表中摘录下来的人口学信息相对应（见图2.1）。

4.1.1 HIV检测概述

目前的HIV检测技术可以检测：

• HIV抗体（如EIA、快速试验、蛋白印迹试验、免疫荧光测定和颗粒凝集试验）

• HIV特异抗原（如EIA、抗原检测）

• HIV病毒核酸（如聚合酶链反应或其它技术）

• HIV（病毒培养）

在发展中国家，对于监测或诊断目的来说，那些检测HIV抗原、病毒核酸或病毒本身的技术价格昂贵，技术上非常困难，并且经常会受到实验室误差的影响。在大多数发达国家，目前用于诊断的检测方法是采用EIA进行标本的筛查，如果阳性，再用蛋白印迹试验进行确证。然而，研究表明, 最新一代的EIA和快速试验与蛋白印迹试验在确证方面同样可靠。除此之外，与蛋白印迹试验相比，EIA和快速试验更为价廉，不需要高技能来操作试验和解释结果，并且出现不确定的检测结果少（Tam 1999；Stetler等1997）。因此，UNAIDS和WHO建议将EIA或快速试验的联合应用作为替代策略对初筛阳性的结果进行确证（UNAIDS 1997）。第一个检测试验（初筛试验）应当具有高敏感性，以确保能够检测到标本中的抗体。第二个检测试验（确证试验）应当具有高特异性，以确证标本中确实含有HIV特异性抗体（UNAIDS/WHO 1999）。

大多数的EIA和快速试验包含HIV－1和HIV－2两类抗原，因此，能够检测到两型HIV的抗体。但大多数的检测无法区分HIV－1和HIV－2。EIA和快速试验被推荐用于HIV监测和诊断，因为这些方法准确性最高，而且费用效益最好。UNAIDS和WHO将EIA和快速试验的复杂性分为四类：（1）不需要额外的设备和实验室经验；（2）需要准备试剂或多步骤操作；（3）需要特殊的技能，如稀释技术；以及（4）需要设备及熟练的实验室技术人员（UNAIDS/WHO 1998）。

4.1.2 酶免疫测定（EIA）

4.1.2.1 一般描述

EIA是基于抗原-抗体之间的基本反应，它可以利用HIV整病毒的溶解物，或者利用病毒的一种或多种抗原。早期的EIA方法与目前的第三代EIA相比会产生更多HIV抗体假阳性结果（Tam 1999）。在早期的EIA中，抗原制备物更容易与宿主细胞（供病毒生存的人类淋巴细胞系）成分发生交叉反应。因此, 开始用EIA筛查发现的阳性反应需要用蛋白印迹试验进行确证。但是，第二代和第三代EIA在特异性和敏感性方面都有明显的改进，使其成为备选的确证试验。重组蛋白和合成肽的应用也提高了敏感性，缩短了HIV初始感染后的窗口期，使得HIV感染能够早期被发现（UNAIDS/WHO 1999）。多种检测HIV的EIA含有HIV-1和HIV-2抗原，并且针对这两种病毒抗体的检测进行了方法上的优化（Tam 1999; UNAIDS/WHO 1999）。

4.1.2.2 EIA的特性

EIA最好是在地区或国家实验室中开展，因为该方法的使用需要有经过培训并具备很好技能的实验室技术人员、技术上先进的设备（孵箱、洗板机和分光光度）。对于每天处理大量（100份或更多）标本或开展标本成批检测的实验室来说, EIA是最合理有效的方法, 这常见于HIV的哨点监测中。由于实验本身设计上的原因， 这样的方法不适合用于少量标本的检测，且费用上不合算。但是，如果实验室通常每天检测至少50份标本的话，EIA则比快速试验更为合适。由于实验室常常将标本成批集中在一起进行检测，因此检测结果通常在标本收集后的数天至2－3周后才能提供。尽管这种滞后对诊断目的来说也许需要加以考虑，但对无关联匿名检测来讲并不是一种不足，因为检测的结果并不反馈给患者，而当天的检测反而会认出被检测者。由于EIA通常是在地区或国家水平上开展，所以只需要在几个实验室中开展质量保证和质量控制（见6.0部分）。EIA在农村地区的应用可能有局限性，因为那里的实验室条件和设备状况可能不能满足需要(表)。

EIA的检测费用为每次1－2美元。当考虑到直接和间接费用（技术、人力资源和设备需求）后，每个检测实际的花费可能为15－20美元（Brown和Burke 1995）。但是，如果直接和间接费用是由所有相关项目（血液筛查、诊断和监测）共同承担的话，对于监测活动来说更为实际的费用可能为4－6美元。

4.1.2.3 EIA 的操作

 EIA可以用于血清、血浆、尿液、唾液或干血滤纸片（洗脱后）标本的检测。检测所需要的时间为2－4小时（包括标本准备和稀释），如果需要对初筛结果进行确证，则再需要3－4小时。在具体使用某种EIA时，应遵循生产厂家提供的说明书。

EIA操作的一般步骤包括：

1. 应用标本缓冲液对标本进行稀释，将稀释后的标本加到预先包埋有HIV抗原的微孔板中。

2. 按照操作规程对微孔板进行孵化，然后按要求进行洗板。

3. 加入抗人免疫球蛋白-酶结合物，如果标本中存在HIV特异性抗体，这种结合物将会与该抗体发生反应。

4. 孵育。

5. 洗板，加入酶底物，再孵育。

6. 加入终止液以结束酶反应，在分光光度计上阅读微孔中溶液的吸光度。

如果微孔中的标本颜色发生改变或颜色变深，则意味着发生了阳性反应。表明标本中存在HIV特异性抗体。最好是利用EIA板在分光光度计下进行定量测定。

 对于成功开展EIA，以下方面是至关重要的：

• 使用未过期的检测试剂盒

• 对使用的设备进行校正和认真维护

• 严格按照厂家说明书中所要求的孵育时间和稀释妒?

• 使用去离子水

• 用分光光度计准确和客观地读取结果

• 针对使用的技术进行培训

• 保持电源的持续供应，停电将会影响试剂的贮存或设备的运转

4.1.3 快速试验

4.1.3.1 一般描述

由于人们希望开发那些当天可获结果，并且除了试剂盒外不需要其他试剂或设备的HIV抗体检测方法，使得目前出现了HIV快速试验。目前的快速试验是基于四种免疫学原则：颗粒凝集法、免疫斑点法(检测条)、免疫过滤法（流动-穿透）及免疫层析法（侧向流动）(UNAIDS/WHO 1998)。大多数HIV快速试验包含HIV－1和HIV－2抗原，用来检测两型病毒的抗体（Tam 1999，UNAIDS/WHO 1999）。根据试验方式的不同，阳性结果呈现为凝块、斑点、圆点或条带。最新一代快速试验的敏感性和特异性与EIA相似。许多快速试验尚处于评估阶段，没有在发展中国家用于筛查、诊断和监测。

4.1.3.2 快速试验的特点

快速试验适用于那些每天HIV检测量不超过100份的小型实验室，或没有电源供应或设备的实验室，以及实验室条件有限的地区。在某些情况下，即使实验室每天检测量超过100份，但也只出现在有限的一段时间内。在这种情况下, 快速试验比EIA可能更加合适。 该方法通常可以在45分钟内出结果，并且结果易于解释。然而，要正确进行检测并对结果加以解释，还需要一定的培训。试剂盒中通常包括检测所需要的所有试剂：不需要额外的试剂和设备。许多快速试验不需要电源、特殊设备、冰箱或高级技术人员，虽然少数对热敏感的试剂需要冷藏。

快速试验适合于在那些难以接近人群（如静脉吸毒者和暗娼）或偏远地区人群中进行HIV关联保密检测。在这些人群中，利用再次接触的机会来提供检测结果是不太可能的，因此，检测（初筛和确证）可能需要在标本收集的当时进行（Respess，Rayfield和Dondero2001）。如果HIV检测结果需要反馈给被检测者，则需要进行确证实验（如再次快速试验或EIA）。

快速试验的费用通常为1－3美元，一次检测的价格比EIA略贵。但是，如果将EIA的其它费用（如设备、实验室设施、技术人员培训）考虑在内的话，快速试验的费用效益可能更好。由于快速试验的操作步骤非常少，因此与EIA相比，发生错误的机会可能会较少。除此之外，大多数的快速试验包含内部质控。但是，当使用快速试验时，需要制定质量保证和外部质控的措施，并且需要在所有使用该方法的场所加以实施（表）。

a   检测技术的费用将受到直接和间接费用的影响。

b   UNAIDS/WHO有关HIV抗体试验复杂程度的四级分类：

    （1）不需要额外的设备和实验室经验；

    （2）需要准备试剂和多步骤操作；

    （3）需要特殊的技能，如稀释技术；以及

    （4）需要设备及熟练的实验室技术人员（UNAIDS/WHO 1998）。

c   应用唾液进行的快速试验正处于现场评估阶段。 EIA：酶免疫测定； QA/QC：质量保证/质量控制。

4.1.3.3 快速试验的操作

快速试验可以用于血清、血浆、全血和唾液标本的检测。基于唾液标本的快速试验目前正处于现场评估阶段。目前尚无用于尿液的快速试验。对于某些快速试验来说，标本准备的时间可能需要10 - 20分钟，但最简单的快速试验不需进行标本准备。因此，确证试验可以在标本加入检测装置或检测条后45分钟内出结果。需要遵循厂家随试剂盒提供的说明书。多数结果易于判定，依照不同的试验方式，其阳性结果呈现为：凝块、斑点、圆点和条带。

对于成功进行快速试验，以下方面是至关重要的：

• 使用未过期的试剂盒

• 针对使用的技术进行培训

• 严格遵循厂家提供的说明书

• 对人为判定的结果进行正确的解释

UNAIDS和WHO提出了选择HIV检测策略（即选择适合的HIV监测技术或多种检测技术的联合使用）(UNAIDS/WHO 1998)的三个标准：

1. 检测的目的（是监测、血液筛查，还是诊断）

2. 所用检测方法的敏感性和特异性，以及

3. 被检测人群的HIV感染率

在确定这三种标准之后，可以选择一种HIV检测策略以达到敏感性和特异性最大，以及费用最低。UNAIDS和WHO推荐的三种HIV检测策略如下（图4）：

策略I：

• 需要一次检测。

• 在具有HIV感染临床症状与体征者中HIV感染率>30%的情况下，用于人群的诊断性检测。

• 用于任何感染率情况下的血液筛查。

• 在HIV感染率>10％的人群中，用于监测目的的检测（如产前门诊孕妇监测中的无关联匿名检测）。不提供检测结果。

策略II：

• 需要最多两次检测。

• 在具有HIV感染临床症状与体征者中HIV感染率≤30%，或无症状者中HIV感染率>10％的情况下，用于人群的诊断性检测。

• 在HIV感染率≤10％的人群中，用于监测目的的检测（如产前门诊或性病门诊患者监测中的无关联匿名检测）。不提供检测结果。

策略III：

• 需要最多三次检测。

• 在无症状人群中HIV感染率≤10％的情况下用于人群的诊断性检测。

对于需要一次以上检测的HIV检测策略(策略II和策略III），检测技术的选择以及这些技术使用的顺序（检测流程）对于获得准确的检测结果是非常重要的。首先，这类试验应当包含不同的抗原; 第二，第一个试验应具备尽可能高的敏感性，而第二个试验应具备尽可能高的特异性。第一个试验为筛查试验，最好具有较高的敏感性来检测出所有阳性标本。由于会出现一些假阳性，第二种试验（确证试验）需要高的特异性，以确保所有真阴性的检测结果被判定为阴性。此外，当使用检测策略II或III时，建议使用那些能够检测血清、血浆或干血滤纸片的试验方法，这样可以用单份标本进行多次检测，不必要额外收集标本。

在用唾液或指尖全血进行快速试验时，标本是直接放在快速试验设备上的。因此，如果第一次检测为阳性，必须收集第二份标本供确证。所以，当采取检测策略II和III时，如果可能的话，建议对同一份唾液拭子或指尖血同时进行两次快速试验，然后将他们作为先后检测加以分析。

在对难以接近的人群进行关联HIV检测时可能会出现这样的检测情况。在这种情况下，只有一次获取知情同意、收集标本、进行检测，以及向被检测者提供足够咨询的机会。只有快速试验能够做到在现场当天进行初筛和确证。如果收集的标本是血液，可以制备成干血滤纸片用作质量保证(Respess, Rayfield和Dondero 2001)。

许多国家采用各种不同的HIV检测方法和流程。例如，国家参比实验室可能采用快速试验进行初筛和EIA进行确证，而地区实验室可能采用与国家参比实验室不同的快速试验进行初筛和确证。由于存在这样的不同，国家级监测协调人需要对全国正在使用的所有检测方法和流程登记建档。除此之外，为了确保监测资料的可靠性和在时间上的可比性，一个国家所采用的检测方法应尽可能的少。

为发展中国家选择适当的HIV检测方法可能是一种挑战，因为在这些国家也许没有一个全国技术顾问组对现有的HIV检测方法进行回顾和评价。所以，选择什么样的检测方法往往是由援助机构来决定，或者可能会受到厂家的影响。

然而，如果国家实验室有条件，这样的国家应该对本国HIV检测技术的操作情况进行评估。但是，在国内开展HIV检测技术的评估可能会受到仪器设备价格昂贵和技术力量缺乏，以及没有能力进行标本处理和向国家实验室运送标本的限制。

如果无法开展国家评价，这样的国家应该对下列选择因素加以了解，然后从UNAIDS/WHO列出的目前可提供的HIV检测方法清单中选择检测方法，或者依据本地区最好由独立的非盈利性机构评估所获得的结果选择检测方法(图5)。

*  在临床和实验室对选用的HIV检测方法确定其敏感性和特异性。

选择因素

在选择HIV检测方法时，首先要决定的是采取什么样的检测方式（EIA、快速试验、或者两种检测方法的联合应用）。然后，需要结合本国的条件对检测技术的操作特点进行回顾。国家条件包括：实验室条件、现有的实验室技术人员情况，以及质量保证与控制的措施。

• UNAIDS/WHO关于何时采用快速试验和/或EIA的建议。UNAIDS和WHO建议在偏远地区、实验室条件很差或没有实验室的地区，以及每天检测量少于100份标本的小型医院采用快速试验替代EIA。在这种情况下，首选快速试验，因为这类方法快速、易于操作，并且多数试剂的存放时间都比EIA长（UNAIDS/WHO 1998）。快速试验在基层应用比较理想，因为它们简单并且间接费用低（特别是用于设备及其维护的费用很低）。UNAIDS和WHO建议在实验室条件良好和具备经过培训的技术人员，以及每天检测量超过100份的医院采用EIA，因为EIA对于成批测定非常合适，并且易于在国家或地区实验室实施（UNAIDS/WHO 1998）。

• UNAIDS/WHO有关现有商品化HIV检测方法操作特点的年度报告。UNAIDS和WHO出版了一份商品化HIV检测方法操作特点的年度报告，其中包括对检测方法的敏感性和特异性、操作的难易程度、小型实验室的适用性，以及价格的评价（UNAIDS/WHO 1999）。这些报告可以通过电子信箱（unaids@unaids.org或 publications@who.int）向UNAIDS或WHO索取。正如4.2部分所述及的那样，建议采用高准确性的检测方法以降低假阴性和假阳性的发生率。UNAIDS和WHO在其修改后的推荐中提出，用于监测的HIV抗体检测方法至少要有95％的特异性（UNAIDS/WHO 1998）。目前，大多数检测方法的特异性在98％或以上，但在现场应用时，这些检测方法的实际敏感性和特异性可能随标本的地区来源不同而有所差异（UNAIDS 1997）。

• 检测方法的现场操作特点。 一个国家对将要选用的检测方法其操作特点加以考虑是重要的。这些重要的特点包括操作的难易程度、每次检测的费用、对贮存的要求、产品的正常存放时间、需要的设备及其维护情况、人员的培训，以及厂家能不能正常提供试剂（1997）。

• 国家条件。影响检测方法选择的国家条件包括每天的检测量、实验室人员的技能、检测的费用、实验室条件、是否有参比实验室、实验室中是否有质量保证和质量控制措施、贮存条件（温度和冷藏条件），以及实验室后勤保障（如实验室用品的提供和电源的持续供应）。

理想的情况下，应该在国家水平上对选择的HIV检测方法进行评价，从而：（1）确定商品化HIV检测方法的敏感性和特异性，以及（2）基于被评估的检测方法的敏感性和特异性的结果对不同检测流程的操作进行验证（Branson 2000）。在国家评估中可以采用一种三阶段评估方法(框图3)。第一阶段在国家参比实验室的理想实验条件下确定这些新检测方法的敏感性和特异性。在第二和第三阶段，则需要前瞻性地收集标本。第二阶段在少数地区级诊所收集标本并在地区实验室进行评估。第三阶段则应在今后应用的现场进行标本的收集和评估。

这种三阶段评估方法已经在洪都拉斯和乌干达采用过（Stetler等1997；Downing等，1998）。在洪都拉斯，第一阶段借助于国家参比实验室贮存的600份标本，对7种快速试验方法进行了评估。根据这些方法的敏感性、特异性以及操作的难易程度，选择了5种检测方法进行第二阶段的评估（n=900）。5种检测方法中的3种在农村医院和诊所进一步进行了第三阶段的前瞻性评估。在这3种检测方法中，对不同检测流程的阳性预期值和阴性预期值进行计算，从而确定哪一种检测流程最合适。国家评估中的这种三阶段评估方法其总体概况见框图3；然而，这种总体概况需要根据具体国家评估的结果进行调整和补充。

＊ 那些仅用全血或唾液进行检测的方法只能在第二和第三阶段进行评价。摘录自Stetler等, 1997

可靠的，并在不同时间能够获得重复结果的HIV检测方法是HIV血清学监测的重要组成部分。采用高准确性的HIV检测方法并不一定能够获得可靠的实验室检测结果。从标本抵达实验室到结果报告之前将要经过许多操作步骤，在这一过程中会出现误差（UNAIDS/WHO 1996）。因此，对实验室系统保持内部和外部监控的过程是非常重要的。质量保证是针对检测结果可靠性和可重复性的整个系统进行动态和持续性监控的过程，如果没有达到规定的标准则可以加以改进。

国家应当要求各级实验室（如医院的HIV实验室、输血部门、以及私立HIV实验室）参与到对他们的操作所进行的外部质量保证。国家参比实验室应当与国家艾滋病项目合作，对开展实验室质量保障体系的效果进行监控，从而发现哪些实验室需要进一步的人员培训或需要其他的改进。

对实验室操作进行外部质量保证最常用的方法是熟练程度的考核（UNAIDS/WHO 1996）。国家参比实验室应当向所有参与质量保证的实验室发放大约6个标本的一组质控标本，让他们检测哪些是HIV阳性，哪些是阴性。这组标本应该包含HIV阴性和HIV阳性标本（由弱至强），这些标本需要对本国的HIV流行株及HIV感染的不同阶段具有代表性（UNAIDS/WHO 1996）。熟练程度考核每年需要进行1－2次。在实验室条件有限的地区，可以用滤纸制成干血滤纸片，然后在国家级参比实验室进行检测，达到质控的目的。对国家参比实验室的外部质量保证可以由独立的实验室（如大学的实验室）或由WHO区域质量保证规划部门来进行。

质量保证体系可以利用标准操作规程来帮助建立一个良好的国家实验室操作系统，并且使得实验室之间能够互通信息（UNAIDS/WHO 1996）。向参与质量保证的实验室反馈评估的结果同样也是重要的。质量保证系统的内容应当包括供实验室技术人员和其它实验室人员使用的操作手册。遵循这些质量保证的程序可以最大程度地保证检测结果的可靠性和准确性。

开展HIV检测的各级（国家、区域和地方）实验室都应该有基本的内部质量保证体系。从事HIV检测的各个实验室都应该对检测过程中的分析前、分析中及分析后阶段的质量进行常规监控和评估。

6.2.1 分析前阶段

分析前阶段包括下列内容：

• 培训

• 实验室安全

• 接受过培训的现有人员数及开展HIV检测的能力

• 标本收集、编码和运输条件

• 检测前标本的处理

• 检测标本的来源和种类

• 检测标本的数量

• 试剂盒的选择

• 试剂盒的有效期。试剂盒必须在有效期之前使用。有效期一般标在试剂盒包装的侧面。对储备的试剂需要仔细地轮翻，这样使得试剂盒的供应更加合理（存放的试剂盒应该在有效期前用完，并且必须在新提供的试剂盒之前首先使用）。

• HIV检测试剂盒的试剂。试剂必须根据厂家说明书中的要求存放在适宜的温度下。一些试剂（如EIA的结合物）可能需要冷藏；试剂盒中其它一些材料可能只需要存放在室温下。

6.2.2 分析阶段

分析阶段包括检测过程本身。需要在质量保证体系中加以了解的内容包括：

• 标本处理和贮存

• 书面操作手册

• 试剂准备

• 检测操作

• 设备（如分光光度计、洗板机）的操作和维护

• 试剂的正确使用

• 试剂盒内包含内部质控

• 质量控制的监控方法
  　

6.2.3 分析后阶段

分析后阶段包括检测后的所有问题，包括：

• 结果解释

• 结果登记，如根据正确的编码填写结果

• 将数据输入到数据库（如计算机或登记表）中

• 记录的维护

• 对质量控制进行回顾

安全预防是非常重要的，并且应该贯穿于整个检测过程：从标本收集到检测、贮存，以及生物有害物品的处理，从而使职业化危害减少到最小。如果需要更多的有关安全预防方面的信息，可参见WHO 1991和CDC 1988年，以进一步了解有关安全预防方面的建议。在附件中概括性地列出了有关HIV及其它经血传播病源菌的预防方法。有关暴露后的预防性治疗请向国家艾滋病控制规划部门咨询。

对实验室所有污染物进行适当处理是重要的（WHO 1991）。临床和实验室所有污染废弃物在丢弃之前应当进行无害化处理;这些污染物包括体液标本、破碎的玻璃器皿、存放污染针头的器械（Richmond和McKinney 1993）。对各种污染废物进行无害化处理的方法（如高压消毒、化学消毒、焚烧）应当到位。无害化处理的物品或需要丢弃到实验室以外的物品都应当装在牢固的、防漏的容器中，然后才能运出实验室。

如果卫生服务人员遵循了以下的指南，那么，意外发生HIV、HBV和其它经血传播病源体传播的危险性则可降到最低。

1. 在使用针具、手术刀和其它锐器或装置时；在操作结束后处置锐器时；在清洗使用过的器械时；以及在丢弃使用过的针头时要小心预防外伤的发生。对用过的针头不要用手去重新盖上针套；不要用手从一次性注射器上移去针头；不要用手弯曲、折断或处置用过的针头。将用过的注射器及针头、手术刀片和其它尖锐物品放在可防止锐物刺穿的专门容器后再丢弃。

2. 用保护性屏障物（如橡胶手套）防止接触血液、含有可见血液的体液和其它需要加以预防的液体。所采用的保护性屏障应该适合于所进行的操作, 以及对可能会暴露的液体具有针对性。

 3. 如果手或皮肤表面污染了血液、含血液的体液或其它需要加以预防的体液时，应立即彻底清洗。

静脉抽血时要配戴手套

在抽取静脉血液（收集血标本）时配戴手套可以减少血液污染双手的机会，但它无法防止被针头和其它尖锐物品刺伤的可能性。在普遍防护原则中，所有的血液都被认为具有潜在感染经血传播病原体的可能，但在某些场所（如自愿献血中心），已知某些经血传播病原体（如HIV、HBV）的感染率是很低的。

认为不需要常规配戴手套进行静脉抽血的机构应当定期重新评估他们的这项政策。应当向那些在抽血过程中希望使用手套的卫生服务人员提供手套。除此之外，还要遵循下列一般原则：

1. 当卫生服务人员的皮肤上有伤口、抓破或其它裂口时，必须配戴手套进行静脉抽血。

2. 当卫生服务人员自己认为血液有可能会污染到手时要配戴手套，如为一名不配合的患者抽血时。

3. 收集指尖血和/或从婴儿及儿童脚上针扎采血时需要配戴手套。

4. 在接受静脉采血培训时要配戴手套。

5. 在操作过程中手接触身体的消毒区域时要配戴无菌手套。除非特别说明，否则在接触粘膜的操作过程中，以及在不需要配戴无菌手套进行病人护理和诊断的过程中需要配戴检查手套。

6. 检查不同病人时要更换手套。

7. 不要将外科或检查用手套清洗或消毒后再次使用。使用表面活化剂清洗后可导致手套“吸水的后果”，如增加了水份从手套中无法检测到的小孔处的通透性。消毒剂可以引起手套的损坏。

8. 在从事可能会接触到血液的家务劳动和清洗仪器，以及去污染操作过程中，要配戴一般的公用手套（如家用橡胶手套）。公用手套在消毒后可以再次使用，但当出现剥皮、裂痕或变色、戳破、撕裂或有其它损坏时要丢弃。

资料来源：  Centers for Disease Control. Perspectives in disease prevention and health promotion update: Universal precautions for prevention of transmission of human immunodeficiency virus, hepatitis B virus, and other pathogens in health-care settings. MMWR Morb Mortal Wkly Rep 1988；37(24): 377－88.

编码： 

    用来确认标本的编号。该编号对某类标本来说是唯一的，它与个人身份信息可以关联，也可以不关联。

集中流行期：   

    该流行状况为HIV在特定人群中已迅速传播。（至少在一个特定人群中HIV感染率持续>5%，但在城市孕妇中<1%。）

酶免疫测定(EIA):  

    一种测定HIV抗体的HIV检测方法。EIA是基于抗原-抗体的基本反应，它可以利用HIV整病毒的溶解物，或者利用病毒的一种或多种抗原。

广泛流行期：   

    该流行状况为HIV在一般人群中形成明确的广泛流行。（孕妇中的HIV感染率持续>1％。）

发生率：

    特定人群在特定时间内新感染或新病例发生的数量（即发病率）。

知情同意： 

    知情同意是基于这样的原则，即有能力的人有权针对医疗服务提供者与患者之间的这种专业上的关系对某些事件的参与和认可作出自己的决定。知情同意确保了个人在选择上的自由和尊重他/她们的自主权，特别是有关对他/她们的身体与健康有影响的决定。

关联匿名检测： 

    在关联匿名检测时，被检测者同意接受HIV检测，但标本的编码不与被检测者姓名或能够识别其身份的个人信息相关联。这种方法是自愿的，并且需要得到知情同意，检测结果可以反馈给被检测者（提供适当的咨询）。

关联保密检测： 

    在关联保密检测时，被检测者同意进行HIV检测，但需要保证检测的结果是保密的，并且只有规定的卫生服务人员可以知道结果。这种方法是自愿的，并且需要获得知情同意，以及与被检测者讨论检测结果。关联保密检测也可以收集更详细的人口及危险行为方面的信息。

低流行期： 

    该流行状况为，尽管HIV感染可能已经存在多年，但在任何人群中HIV从未达到明显的程度。（在任何人群中HIV感染率均未超过5％。）

阴性预告值：

    在HIV检测中，检测结果阴性时为非感染者的概率。

阳性预告值：

    HIV监测中，检测结果阳性时为感染者的概率。

感染率：

    特定人群中在某一特定时点上患某种疾病或具备某种情况者的比例。

熟练程度评估标本：

    在这组标本中含有HIV阴性和HIV阳性（从弱至强）的标本，这些标本需要对本国的HIV流行株及HIV感染的不同阶段具有代表性。该组标本大约有6个标本，应向参与的实验室每年发放1－2次，用于质量保证检测。

质量保证：

    质量保证是针对检测结果可靠性和可重复性的整个系统进行动态和持续性监控的过程，如果没有达到规定标准则可以加以改进。

第二代HIV监测：

    由世界卫生组织和联合国艾滋病规划署开发的第二代HIV监测是旨在改善HIV监测的一种理论性框架。第二代HIV监测的指南提出了资料更好利用的方法，从而提高和改进对HIV流行所作出的反应。

试验的敏感性：

    能够正确识别出HIV感染者的概率指标。

哨点监测：

    通过“观望点”开展的监测。通过这种监测点可以接近目标人群或对整个人群有一定代表性的人群。

血清监测：

    通过HIV抗体出现与否的血清学方法开展的流行病学调查或活动。除了临床上明显的病例以外，潜伏的亚临床感染及携带者可以通过这种方式检测出来。

试验的特异性：

    能够正确识别出HIV非感染者的概率指标。

检测策略：

    采用一种适合的HIV检测方法或多种检测方法的联合应用。检测策略的选择取决于检测的目的、检测方法的敏感性和特异性以及被检测人群的HIV感染率。HIV检测策略的制定是基于准确性最高和费用最低的原则。

无关联检测：

    在无关联检测中，标本最初是为其它临床目的而收集，在将所有的可以识别标本来源的个人身份信息去除后所进行的HIV检测。

免疫印迹试验：

    一种HIV检测方法，它采用电泳转印迹方法将蛋白从凝胶转印到薄型硬质的支撑物上，然后通过与标记的抗HIV抗体结合进行检测。

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